细胞系的建立

细胞系的建立是指从动物或人体组织中分离出细胞，经过体外培养，使其无限增殖，形成稳定的细胞群体。这个过程通常分为以下几个步骤：

组织分离： 从动物或人体组织中分离出所需的细胞。

初代培养： 将分离得到的细胞接种于培养瓶中，在适宜的培养条件下进行培养。

传代培养： 当细胞生长到一定密度时，进行传代培养，以维持细胞的生长状态。

克隆化： 从传代培养的细胞中分离出单细胞，进行克隆培养，获得纯系的细胞。

细胞系的建立： 克隆化的细胞经过多次传代，形成稳定的细胞系。

（图源网络分享，侵删）

细胞系的鉴定

细胞系的鉴定是为了确定细胞的种类、纯度和遗传稳定性，确保实验结果的可靠性。常用的鉴定方法有：

形态学鉴定

直接观察法： 利用倒置显微镜观察细胞的形态、大小、生长方式等。

染色法： 通过染色观察细胞核、细胞质等结构。

免疫学鉴定

免疫荧光染色： 用荧光标记的特异性抗体检测细胞表面或内部的标志物。

流式细胞术： 通过荧光标记的抗体对细胞进行分型和计数。

Western blot： 检测细胞内特异性蛋白的表达。

遗传学鉴定

核型分析： 分析细胞的染色体数目和结构。

STR分型： 检测细胞的短串联重复序列，用于细胞身份鉴定。

SNP分析： 检测细胞的单核苷酸多态性，用于细胞系溯源。

功能鉴定

酶活性测定： 检测细胞内特异性酶的活性。

激素分泌测定： 检测细胞分泌激素的能力。

药物敏感性测定： 检测细胞对药物的反应。

细胞系鉴定的重要性

确保实验结果的可靠性： 不同细胞系的生物学特性存在差异，使用错误的细胞系会导致实验结果的偏差。

避免交叉污染： 细胞系的交叉污染会影响实验结果，甚至导致实验失败。

满足监管要求： 在科研和药物研发中，细胞系的鉴定是必不可少的。

影响细胞系稳定性的因素

传代次数： 传代次数过多可能导致细胞发生遗传变异。

培养条件： 培养条件的变化可能影响细胞的生长和特性。

污染： 细菌、真菌、支原体等污染会影响细胞的生长和功能。

细胞转化： 细胞可能发生恶性转化，导致细胞特性发生改变。

细胞系库

为了方便科研人员使用，世界各地建立了许多细胞系库，如ATCC（美国典型培养物保藏中心）、ECACC（欧洲细胞培养物保藏中心）等。这些细胞库收集和保存了大量的细胞系，并提供相关信息和服务。