分光光度计通过测量样品对特定波长光的吸收来定量分析化学成分,仪器的准确度直接影响到分析结果的可靠性。因此仪器需要定期进行波长校准和性能验证,以确保其始终处于最佳工作状态,分光光度计波长准确度的检查与校正是确保仪器测量准确性和可靠性的关键步骤,以下是关于波长准确度的检查与校正的步骤顺序,希望可以帮到大家!
一、波长准确度的检查
选择标准物质:使用具有已知吸收峰的纯化合物作为波长校准的标准物质,如氘灯、汞灯等光源,或在紫外区有强特征吸收峰的苯蒸汽等。这些标准物质的吸收峰位置应与文献值一致,以确保检查的准确性。
测量吸收峰:将标准物质置于分光光度计的样品室中,设定仪器在预期波长范围内进行扫描,记录吸收峰的位置。
比较测量得到的吸收峰位置与标准物质的文献值,如有偏差,则需要进行校正。
二、波长准确度的校正
调整仪器参数:根据测量结果,调整分光光度计的波长刻度,使仪器的读数与实际波长相匹配。这通常涉及到仪器的波长校准系统,可能需要使用特定的校准软件或工具。
在校正过程中,应逐步调整波长设置,并反复测量吸收峰位置,直至达到满意的准确度为止。
使用标准溶液进行验证:除了直接调整仪器参数外,还可以使用已知浓度的标准溶液进行验证。在紫外和可见光波段(如254nm、365nm和546nm等)分别测量标准溶液的吸光度,并与标准值进行比较。
计算实测波长与标准波长之间的偏差,并据此调整仪器设置,以确保波长准确度的可靠性。
三、注意事项
环境条件:在进行波长准确度的检查和校正时,应确保仪器所处的环境条件稳定,避免温度、湿度和光照等因素对测量结果的影响。
操作规范:所有操作应按照仪器说明书和校准规程进行,确保操作的正确性和一致性。
记录与追踪:详细记录每次波长准确度的检查和校正结果,包括使用的标准物质、测量条件、测量结果和校正措施等。这有助于追踪仪器的性能变化,并为后续的校准和维护提供参考。
定期校准:分光光度计的波长准确度可能会随时间和使用次数的增加而发生变化。因此,建议定期(如每年或根据实验室的具体要求)对仪器进行波长准确度的检查和校正,以确保其始终处于最佳工作状态。